什么是crispr/cas9脱靶效应
CRISPR/Cas9脱靶效应是指在进行基因编辑时，CRISPR/Cas9系统对目标基因以外的其他基因或位点产生意外的切割或修饰的现象。CRISPR/Cas9是一种广泛用于基因编辑的技术，其中CRISPR代表规律间隔成簇短回文重复序列，而Cas9是一种来源于细菌的蛋白，能够识别特定的DNA序列并进行切割。
CRISPR/Cas9基因编辑技术的目标是精确地对特定基因进行操作，但其过程中存在一个关键问题，即所谓的脱靶效应。这个效应源于引导Cas9进行切割的20bp左右的引物，它必须精确匹配目标基因的特定位置，也就是PAM序列附近的碱基。
crispr/cas9系统进入体内后，引物会特异识别要编辑的基因及其序列位置，引导Cas9对其识别位点（PAM序列）前几个碱基随机进行切割。然而，这段20bp左右的引物并不是绝对特异的，有可能识别基因组上其他与其序列相似的基因序列，如果识别到其他基因序列就会造成脱靶效应，造成其他非目标基因的突变。
脱靶效应，即指基因编辑过程中未能精确命中预设目标，出现偏离现象。这一现象在CRISPR-Cas9基因编辑技术中尤为突出，引起了科学家们的关注。然而，一项由CRISPR技术发明人詹妮弗·杜德纳领导的研究团队取得了突破。
脱靶效应是指未能达到预先设定的目标，有所偏移的现象。【拓展】CRISPR 技术脱靶效应有了解决之道 CRISPR 基因编辑技术广受争议的最大副作用——脱靶效应有了解决办法。
重磅发布:珠海舒桐团队开发超灵敏特异的脱靶检测方法AID-seq发表于Cell...
1、AID-seq在灵敏度与特异性上均优于现有脱靶检测方法，尤其在检测Cas12a脱靶方面显示出显著优势。它能够同时检测多条sgRNA的在靶与脱靶情况，适用于sgRNA筛选，显著提高CRISPR on-/off-target检测的通量与效率。
如何通俗地理解基因编辑中的脱靶效应?它跟基因编辑的安全风险有着怎样的...
1、匹配程度取决于氢键形成的化学平衡，识别序列越短，找到相似序列的概率和匹配的稳定性就越低，脱靶风险相应提高。与人体细胞的精确复制转录翻译机制相比，CRISPR-CAS的结合过程可能存在偏差，可能导致非特异性切割，就像中国科学家在编辑人类胚胎时所观察到的那样，产生了一系列无法预料的突变。
2、识别序列的长度限制了其对相似序列的匹配概率和脱靶效应的最小可能性。在实际操作中，结合过程的精确度与真正的人类复制、转录、翻译酶系相比有所欠缺，这可能导致其错误地结合到非目标序列上。在中国科学家尝试编辑人类胚胎的案例中，发现存在大量非特异性切割，产生了复杂多样的突变。
3、那脱靶效应，说的是定位的问题，编辑一个基因，需要引导序列把要编辑的位置找出来，如果找错了，就是脱靶。脱靶的问题可大可小，严重的会影响其他重要基因的功能，轻微的可能会定位到没有基因的DNA位置上，可能对人没有什么影响。
4、脱靶效应，即指基因编辑过程中未能精确命中预设目标，出现偏离现象。这一现象在CRISPR-Cas9基因编辑技术中尤为突出，引起了科学家们的关注。然而，一项由CRISPR技术发明人詹妮弗·杜德纳领导的研究团队取得了突破。
RNA干扰的RNA干扰回复实验
1、RNA干扰回复实验主要关注Off-target效应，即RNA干扰在非特异性调控大量基因的情况。
2、RNA干扰回复实验，主要是为了说明Off-target效应。
3、表型效应。根据查询今日头条得知，回复实验是通过表达目的蛋白的方式回复RNAi的表型效应。RNA干扰回复实验（RescueExperiment）：是RNAi一种十分有价值的对照实验来证明siRNA的作用特异性，避免Off-target效应。