已获得一个功能未知的基因,如何通过实验方法确定该基因的功能?
组织细胞定位,比如是膜蛋白还是胞内蛋白什么的。knock-down knock-out overexpression 根据基因序列推知其表达蛋白的一级序列,用生物信息学方法进行结构和功能的预测,再实验验证。
我也在做这方面的工作,我目前的理解是:基因克隆出来之后转入表达载体,然后侵染转入植物(拟南芥,烟草之类的),处理之后通过测量生理指标说明基因的功能。
通过DNA测序来得到它的序列。如果对比后发现是已知基因就可以知道它的功能。如果是未知的基因现在的科学技术无法知道它的功能。分子生物学技术只能通过大规模的筛选来得到有相关功能的基因序列,而并不能分析出一个未知的功能基因的功能。
查查与其同源的基因在其它生物尤其是亲缘关系很近的生物体内有没有已经被证明功能的,或者猜想与什么功能有关的。寻找突变体(该基因缺失的个体)或者设计序列沉默该基因,然后观察其表型和正常个体有什么差别。寻找该基因过量表达的个体,观察表型和一般个体的差异,也可以作为一个参考。
如何研究一个基因的功能?
1、可以从一下几个方面入手:通过查阅文献得知该基因的生物学意义或者存在的临床意义,这个研究一个基因的灵魂,好的基因选择会使后续结果事半功倍,研究有意义的基因是我们开展实验的首选。基因组层面:可以研究DNA甲基化水平的影响,一般是和启动子区域结合起来分析,此为表观遗传学范畴。
2、方法一 利用RNA干扰技术,使小鼠该基因不能正常表达,对比正常小鼠,从而知道该基因的功能。
3、研究方法有二:计算机预测基因功能、实验确认基因功能。
4、研究模式生物的基因功能的主要途径包括序列获得、功能预测和生物学功能验证。 序列获得:首先,我们需要从模式生物的基因组中获得目标基因的序列信息。模式生物一般具有基因组小、易进行转基因或容易获得突变体等优点,这使得我们能够相对容易地获得目标基因的序列。
已知一蛋白编码基因的序列,请问可采用怎样的方法分析,推测其功能
首先如果知道编码这种蛋白的基因的话,应当表达该基因,原核基因最好原核表达,真核基因最好真核表达。这样便于后期研究使用。2 蛋白质的功能首先观察这种蛋白是膜蛋白还是分泌型蛋白,通过软件分析都可以预测。 因为膜蛋白很可能是受体或共受体。
先做序列分析。看是编码序列还是非编码序列。如果是编码序列,则看所编码的蛋白质功能。非编码序列,到Google上搜promoter prediction。然后输入你的序列。可以推测该序列作为promoter的功能。 证明就是要做实验了。ChIP是金标准。原理就是先固定活细胞,使DNA和其上所结合的蛋白发生交联。
先搞定它的序列,找到之后设计引物,用PCR扩增出来后连到质粒表达载体上再转染进细胞(感受态大肠杆菌)中即可实现它的过表达。
用什么技术检测那些基因起作用?
1、聚合酶链反应-限制性片段长度多态性分析技术 聚合酶链式反应(PCR)是一种用于放大扩增特定的DNA片段的分子生物学技术,它可看作是生物体外的特殊DNA复制,PCR的最大特点是能将微量的DNA大幅增加。该法一般用于检测已知的突变位点。
2、基因芯片测序技术可以将经过连锁分析锁定了目标范围或经过全基因组筛选的特定基因或区域进行更深一层的研究,是解决连锁分析无法发现致病基因的有效手段。基因芯片技术对于已知基因突变的筛查具有明显优势,可以快速、全面地检测出目标基因突变。同时,由于目标区域受到了限制,测序范围大幅度减少,测序时间和费用相应降低。
3、基因检测是通过血液、其他体液、或细胞对DNA进行检测的技术。基因检测可以诊断疾病,也可以用于疾病风险的预测。疾病诊断是用基因检测技术检测引起遗传性疾病的突变基因。中源协和基因检测目前应用最广泛的基因检测是新生儿遗传性疾病的检测、遗传疾病的诊断和某些常见病的辅助诊断。
科学家是如何确定一个基因所代表的功能的?
科学家揭示基因功能的过程,就像侦探解开一个复杂的谜团,首先需要一个线索,那就是一个表型现象。例如,他们会对小鼠、果蝇、斑马鱼或线虫这样的模式生物进行研究,聚焦于一个引人关注的特性,比如眼睛的发育。
全基因组范围的代谢网络在基因组序列的基础上,结合基因功能注释信息,把基因编码蛋白所催化的生化反应构建为一个代谢网络,反应了基因-蛋白质-生化反应之间的相互作用,从而有效地转化为数学模型在计算机上进行模拟、分析,并用实验数据加以验证,提出假设。
抛砖引玉。通过敲除改段基因看看有哪些性状\功能缺失。通过测RNA产物知道哪些被切掉了哪些没被切掉。
他表示通过这项研究已经确定了人类身高相关的特定基因,因为身高是一种非常复杂的人类特征,它是由环境因素以及遗传因素综合影响决定的最终身高,他们的这项研究重点是软骨细胞,软骨细胞决定了每一块骨头在未来能够达到的长度以及形状,也被称呼为生长板区域的繁衍生息。
作为遗传学之父孟德尔把基因称为遗传因子。约克逊把遗传因子起名为基因。那么科学家们自然就应当想到基因是如何控制的生物性状?性状与基因的转录翻译有着直接的关联。
那么,基因的内部结构是什么样的,科学家又是如何确定它的呢? 实际上,在遗传学发展的早期阶段“基因”仅仅是一个逻辑推理概念,而并非一种已经得到证实了的物质和结构。在本世纪30年代,由于证明了基因是以直线的形式排列在染色体上,因此人们认为基因是染色体上的遗传单位。